ДНТ-TИPLЯШDИRMЯ (организмлярин молекулйар-эенетик яламятляря эюря фярдлярин тяйин едилмяси, ДНТ-фярдиляшдирил- мяси) – биоложи обйектин фярди эенетик хцсусиййятляриндя охшарлыьын тяйин едилмяси. Тядгигатын мягсяди мцхтялиф ор- ганизмлярин охшарлыьыны (йахуд фяргли олмасыны) мцяййянляшдирмякля онларын гощумлуг дяряъясини тяйин етмякдир.
ДНТ-т. методу мцхтялиф фярдлярдя ДНТ гурулушундакы фярглярин мювъудлуьуна ясасланыр. Бу, структур полиморфизминя малик (бир нечя аллел формасы вар) щипервариабел сащяляря аиддир. Бунларын формалашмасында, ясасян, мцвафиг 15–70 вя 2–5 ъцт нуклеотиддян тяшкил олунмуш минисателлит вя микросателлит ДНТ адыны алмыш нисбятян гыса нуклеотид ардыъыллыглар ясас рол ойнайыр. Щямин ардыъыллыглар эеномлар цзяриндя блоклар (локуслар) шяклиндя сяпялянмиш вя бир-биринин ардынъа дяфялярля тякрар олунан тандем формасында дцзцлмцшдцр. Тандем тякрарланмаларын сайы 2–4-дян бир нечя минядяк олур. Щомоложи сателлит блокларда тякрарланан елементлярин мювъудлуьу локусларын (мяс., рестриктаза фрагмент- ляри узунлуьунун полиморфизм феномени кими тязащцр етмяси) структур полиморфизминя сябяб олур. Бу ъцр фрагментляр ДНТ-нин рестриктазалар тяряфиндян ферментатив парчаланмасындан сонра ямяля эялир (онларын нуклеотид тяркибинин хцсусиййятляриня эюря тякрарланмалар ичярисиндя парчаланма баш вермир). ДНТ-т.-нин илк вариантларында ДНТ фрагментляри агароза эелиндя електрофорезля айрылыр вя бу эелин нахышы (изи) мембран филтриндя алыныр. Сонра ися тяркибиндя хцсуси сечилмиш зондлары (радиоизотопларла нишанланмыш ДНТ фрагментляри) олан мящлулда инкубасийа едилир. Тядгиг олунан ДНТ-нин тяркибиндя зонда комплементар олан сащяляр онун юзц иля бирляшир (щибридляшир) вя радиоавтографийанын кюмяйиля ашкарланыр. Беляликля, радиощяссас плйонкада истифадя едилян зонда щомоложи олараг радиощяссас плйонкада эеном ДНТ-синин бцтцн микро вя минисателлитляри золаглар дясти шяклиндя дярщал идентификасийа едилир. Дактилоскопик нахышын (излярин) анализиня уйьун (папиллйар хятлярин нахышы кими) аналоэийа цзря “эенетик, йахуд эеном дактилоскопийасы” термини йаранды. Щяр бир фярд юзцнямяхсус эеном нахышы иля фярглянир вя золагларын сайы, шырымларда онларын йерляшмяси, щяр золаьын гаралма интенсивлийи иля сяъиййялянир. Гощумлуг чох олдугъа, уйьунлуглар да чох олур. Бурада папиллйар нахышлара нисбятян фярди спесификлик даща йцксякдир вя буна ясасян дя эеномун нахышы шяхсиййятин “эенетик шящадятнамяси” ола биляр. Ган гощумларында бир-бириня уйьун эялян золагларын сайы нязяря чарпаъаг дяряъядя чохдур, якизлярдя ися онлар там охшардыр. Полимераза зянъирвары реаксийа (ПЗР) методунун ишляниб-щазырланмасы (1980 иллярин сону) ДНТ-нин истянилян ардыъыллыьыны чохалтмаьа (амплификасийа етмяйя), онун он вя йцз милйонларла нцсхясини алмаьа вя чох кичик мигдарлы биоложи материалын молекулйар-эенетик анализи цчцн истифадясиня имкан верди. Ферментатив парчаланмайа мяруз гоймадан минисателлит ДНТ-нин айры-айры бцтюв локусларынын узунлуьуну мцгайися етмяк, йяни полиморфизмля сечилян амплификасийайа уьрамыш фрагментлярин узунлуьуну (ПСАУФУ) анализ етмяк имканы йаранды. ПЗР мящсулларынын електрофорезля айрылмасындан сонра онларын эелдяки вязиййяти хцсуси бойаларла, флцорессент нишанлама вя с. иля ашкарланыр. Щямчинин ПСАУФУ-ун бир нечя локусуну (бунларын сайы 10-дан чох ола биляр) ейни заманда анализ едян мултиплекс амплификасийа системи ишляниб щазырланмышдыр. Бу щалда локусларын ъяминдян йаранмыш вя амплификасийайа уьрамыш ДНТ-нин профили щяддян артыг полиморф олур (бир нечя мцстягил полиморф елементин комбинасийасыдыр) вя бунунла бярабяр, анализин йцксяк дцрцстлцйцнц тямин едир.
Мини- вя микросателлит ДНТ-нин полиморф эенляринин гурулушундакы вариабеллик щямчинин, нуклеотидлярин нюгтяли явязедилмяляри нятиъясиндя мцмкцндцр. Беля локуслар йалныз нуклеотид тяркибиня эюря фярглянир. Бу щалда амплификасийайа уьрамыш фрагментлярин илкин гурулушу мцяййян едилир (бах Секвенляшмя). ДНТ-т.-нин ян тякмил методу фрагментлярин секвенляшмясиня ясасланан йцксяк полиморфизм сявиййяси, чохлу нцсхялярин олмасы, рекомбинасийанын олмамасы вя ирсиййятин ана тяряфдян кечмяси иля (рцшейм митохондриляри йалныз йумурта-щцъейрядян алыр) сяъиййялянян мтДНТ (митохондри ДНТ-си) анализидир. Бцтцн бунлар популйасийа вя филоэенетик тядгигатларда мтДНТ-дян эениш истифадя едилмясиня имкан верир, бязи щалларда ися ону ДНТ-т. цчцн йеэаня мцмкцн олан васитяйя чевирир; мяс., нцмунянин тяркибиндяки ДНТ хейли позулдугда, хромосом ДНТ-си ися амплификасийайа уьрайа билмядикдя, ирсиййятин ана хяттиля кечмяси вя рекомбинасийанын олмамасы мтДНТ-ни эенетик маркерин истигамяти эюрцнян шяъяря кими истифадя едилмясиня имкан верир. Гощумлары айыран эенетик дистансийанын бир нясилдян чох олдуьу щалда, гощумлуьун тяйин олунмасында бу хцсусиля ящямиййятлидир.
Русийа, Британийа вя Америка алимляринин 1992–98 иллярдя Русийа император аиляси цзвляринин бядян галыгларынын идентификасийасы цзря апардыьы тядгигат ишиндя ДНТ-т. цчцн мтДНТ-дян истифадя едилмяси парлаг нцмунядир. Сонралар йашы он, йцз вя щятта он мин илляр олан сцмцк вя мумийаланмыш бядян галыгларынын фярдиляшдирилмяси цчцн мтДНТ анализиндян дяфялярля истифадя олунмушдур.
ДНТ-т. методу криминалистикада шяхсиййятин идентификасийасы вя гощумлуг ялагяляринин тяйин едилмясиндя, щямчинин тибби-биоложи анализдя ишлядилир. Щейванларын вя биткилярин эенетика вя селексийасында тямизъинсли щейван няслинин паспортлашдырылмасы вя сечилмяси, битки сортларынын типляшдирилмяси, нюварасы вя сортарасы фярглярин мцяййян едилмяси, тяърцби бактериолоэийа вя епидемиолоэийада ися бактерийа штамларынын идентификасийасында бу методдан истифадя едилир. ДНТ-т. эенетик апаратын структур-функсионал хцсусиййятляринин тядгиг едилмяси, щцъейрялярин
нормал фяалиййятиндя вя патоэенездя эеном гейри-стабиллийи щадисясинин юйрянилмясиндя, популйасийа вя тякамцл эенетикасында тятбиг едиля биляр.
